分子诊断技术实验指导

分子诊断技术实验指导
作 者: 杜颖青 邱美兰
出版社: 高等教育出版社
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暂缺《分子诊断技术实验指导》作者简介

内容简介

《分子诊断技术实验指导》是校企合作开发的教材,是“分子诊断技术数字课程”的配套教材。全书共十一章。第一章和第二章分别介绍基因和蛋白质检测定量的基本操作技术和原理。第三章和第四章是基于凯普公司拥有自主知识产权的导流杂交技术平台而设计的综合性实验,主要介绍利用导流杂交技术与PCR相结合的检测技术平台,对人乳头状瘤病毒和地中海贫血的分子诊断。第五章和第六章是PCR-荧光探针法对人乳头状瘤病毒和乙型肝炎病毒的分子诊断。第七章介绍重组质粒pMD- 18-T-HPV18的构建。以上七章内容为综合性实验,以临床疾病的基因或蛋白质为实验对象,所选实验项目具有可操作性强、实用性高等优点。第八章介绍分子诊断常用仪器的使用和日常维护保养。第九章介绍分子诊断临床样品的采集与前期处理。第十章介绍临床PCR实验室。第十一章介绍自主设计性实验。《分子诊断技术实验指导》密切结合医学检验与分子诊断试剂生产企业的人才培养需求,以应用为导向,既能作为分子诊断技术实验课程的指导教材,亦可作为医学检验、分子诊断试剂生产公司技术人员以及其他相关领域的参考书。

图书目录

第一章 实时荧光定量PCR检测P-glycoprotein的基因表达

实验一 人源P-glycoprotein基因序列的获取及其引物设计

实验二 A549-DDP细胞中总RNA的提取

实验三 紫外分光光度法测定A549-DDP细胞的RNA浓度和纯度

实验四 琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA纯度和完整性

实验五 A549-DDP总RNA的反转录和cDNA浓度测定及纯度鉴定

实验六 实时荧光定量PCR法对P-glycoprotein基因的定量检测

第二章 免疫印迹法测定P-glycoprotein的蛋白表达

实验一 A549-DDP细胞中全蛋白的提取及电泳样品的制备

实验二 SDS-PAGE法检测A549-DDP细胞中全蛋白的表达

实验三 电转印法转移SDS-PAGE凝胶上A549-DDP细胞中全蛋白

实验四 考马斯亮蓝染色法和丽春红染色法检测电转印法的转膜效果

实验五 A549-DDP细胞中P-glycoprotein的相对定量分析

第三章 导流杂交基因芯片技术对人乳头状瘤病毒的分子诊断

实验一 HPV-6b和HPV-18大肠杆菌DNA的分离纯化

实验二 紫外分光光度法测定大肠杆菌DNA的浓度和纯度

实验三 HPV-6b大肠杆菌菌株和HPV-18大肠杆菌菌株DNA的PCR扩增反应

实验四 导流杂交基因芯片技术对HPV的基因分型检测

第四章 导流杂交基因芯片技术对地中海贫血的分子诊断

实验一 固相提取法提取血液基因组DNA

实验二 紫外分光光度法测定血液基因组DNA浓度及纯度

实验三 临床血液基因组DNA的PCR扩增反应

实验四 导流杂交基因芯片技术对a、B地中海贫血的基因分型检测

第五章 PCR-荧光探针法对人乳头状瘤病毒的分子诊断

实验一 HPV-18大肠杆菌菌株DNA的提取

实验二 多重荧光PCR法对(12+2)高危型HPV病毒核酸的检测

第六章 PCR-荧光探针法对乙型肝炎病毒的分子诊断

实验一 固相提取法提取血液基因组DNA

实验二 PCR-荧光探针法对HBV病毒核酸的检测

第七章 重组质粒pMD-18-T-HPV18的构建

实验一 PCR法扩增目的基因

实验二 琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增产物的纯度

实验三 PCR扩增产物的回收及纯化

实验四 目的DNA片段与载体的重组连接

实验五 连接产物转化

实验六 重组子的筛选与鉴定

实验七 大肠杆菌DH5a的培养及菌株的保存

实验八 质粒提取

实验九 核酸定量分析及质粒拷贝数的计算

第八章 分子诊断常用仪器的使用与维护

第一节 移液器的使用、维护与校准

第二节 离心机的安全操作与保养维护

第三节 消毒灭菌设备的使用与维护

第四节 医用核酸分子杂交仪HB-2012A的使用与维护

第九章 分子诊断临床样品的采集与前期处理

第一节 血液标本的采集与前期处理

第二节 血清标本的采集与前期处理

第三节 尿液标本的采集与前期处理

第四节 生殖道标本的采集与前期处理

第五节 宫颈脱落细胞标本的采集与前期处理

第十章 临床PCR实验室介绍

第一节 临床PCR实验室分区规划与设计原则

第二节 临床PCR实验室各区主要功能及配置

第三节 临床PCR实验室质量管理体系的建立

第四节 临床PCR实验检测的全面质量保证

第五节 临床PCR实验室防污染处理的一般措施

第十一章 自主设计性实验

实验一 沙眼衣原体/淋球菌/解脲脲原体混合感染的检测

实验二 耳聋易感基因的检测

实验三 葡糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因检测

实验四 苯丙酮尿症PAH基因的检测

实验五 人巨细胞病毒核酸的检测

实验六 B族链球菌DNA的检测

实验七 乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的性能评价

实验八 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性的分析

附录一 常用试剂、缓冲液的配制

附录二 核酸和蛋白质电泳凝胶的配方及有效分离范围

附录三 核酸和蛋白质相关参数的换算

附录四 常用词汇的中英文对照