运用CRISPR-Cas系统靶向突变型KRAS肿瘤的新策略及研究进展

第一部分 KRAS靶向治疗在癌症中的研究进展和临床意义

1 KRAS基因概述

2 KRas蛋白的主要作用途径

3 KRAS基因突变及其临床意义

3.1 常见KRAS基因突变的分型及分子机制

3.2 临床意义

3.2.1 肺癌

3.2.2 结直肠癌

3.2.3 胰腺癌

4 国内外发展动态

4.1 KRas可以被“沉默”

4.2 给KRASG12C一个“刹车”

4.3 首次鉴定出抑制RAS癌基因的小分子

4.4 PKC可以调节KRas上的法尼酰——静电开关

4.5 靶向ACSLa治疗肺癌的新靶点

4.6 基于小分子化合物的“协同致死化学筛选”体系的建立

4.7 p110位点的发现

5 目前针对KRAS基因突变常用策略

5.1 直接靶向抑制KRAS基因

5.1.1 AMG510

5.1.2 MRTX849

5.1.3 ARS-3248和LY3499446

5.2 间接靶向KR4S基因

5.2.1 抑制Kras信号传导通路

5.3 联合途径抑制

5.3.1 RAS-效应相互作用抑制剂

5.3.2 曲美替尼（Trametinib）联合羟氯喹曲美替尼单药

5.3.3 MRTX849联合抑制

6 总结与展望

参考文献

第二部分 CRISPR-Cas系统的功能和应用

1 CRISPR-Cas系统的探索与发现

2 CRISPR-Cas系统的结构组成及作用机理

2.1 CRISPR-Cas系统的结构组成

2.1.1 前导序列

2.1.2 CRISPR基因阵列

2.1.3 cas基因家族

2.1.4 tracrRNA

2.2 CRISPR-Cas系统的作用机理

3 CRISPR-Cas系统的分类

3.1 CRISPR-Cas系统——种类1

3.2 CRISPR-Cas系统——种类2

4 CRISPR-Cas9基因编辑技术在抗肿瘤免疫治疗中的应用

4.1 基因编辑技术的研究进展

4.2 在免疫检查点抑制剂（immune checkpoint inhibitor）阻断疗法上的应用

4.3 在CAR-T细胞免疫疗法中的应用

4.4 在抗体靶向疗法中的应用

5 CRISPR-Cas9系统在其他医学领域的研究进展

5.1 构建肿瘤疾病模型

5.2 治疗单基因及多基因遗传性疾病

5.3 在病毒性疾病上的治疗应用

6 CRISPR-Cas9存在的问题及技术改进的方法

6.1 脱靶现象

6.1.1 设计高效特异性sgRNA

6.1.2 调节Cas9-sgRNA的浓度

6.1.3 递送载体的选择

6.1.4 Cas9核酸酶的改造

6.2 修复精准度低且错误率高

6.3 马赛克现象（Mosacism）

7 基于CRISPR-Cas9系统的突变型RAS肿瘤治疗新思路和研究方法

7.1 靶向突变型KRAS核酸蛋白复合物功能的初步验证

7.2 靶向突变型KRAS核酸蛋白复合物设计的优化

8 总结与展望

参考文献

第三部分 基因编辑传递系统及外泌体的应用

1 基因传递系统的介绍

2 病毒载体

2.1 逆转录病毒

2.2 慢病毒

2.3 腺病毒

2.4 腺相关病毒

3 非病毒载体

3.1 纳米药物（nanomedicines）的介绍

3.2 脂质纳米颗粒载体（Lipid nanoparticles, LNs）

4 外泌体及其在医学研究上的开发和应用

4.1 外泌体的介绍

4.2 外泌体转载药物的方式

4.2.1 药物与外泌体共孵育

4.2.2 物理方式——电穿孔

4.2.3 外泌体的转染

4.2.4 “细胞工程”活化供体细胞

4.2.5 转染供体细胞

4.2.6 外泌体转载靶蛋白

4.2.7 装载的外泌体药物的靶向策略

4.3 外泌体与疾病治疗

4.4 外泌体的应用和局限性

4.4.1 外泌体的主要应用

4.4.2 外泌体对CRISPR-Cas系统的载运

4.4.3 外泌体在应用上的局限性

5 RNA纳米颗粒修饰的外泌体作为CRISPR-Cas9系统的载体

6 总结与展望参考文献