临床微生物检验标准化操作程序

临床微生物检验标准化操作程序
作 者: 周庭银
出版社: 上海科学技术出版社
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作者简介

  周庭银:海军军医大学附属长征医院实验诊断科主任技师。从 事临床微生物检验及科研工作40余年,在临床微生物鉴定 方面积累了丰富的经验,尤其是对疑难菌、少见菌株鉴定的 研究有独到之处。在国内首次发现卫星状链球菌、星座链球 菌、霍氏格里蒙菌、拟态弧菌等多株新菌株。近年来先后帮 助国内多家医院鉴定40余株疑难菌株。主办国家医学继续 教育“疑难菌株分离与鉴定”学习班22期(培训2800余人), 2013年发起成立上海疑难菌读片会,并已成功举办15期。 成功研究并解决了血培养瓶内有细菌生长,但革兰染色看不 到菌、转种任何平板无细菌生长这一难题。研制了新型双向 显色血培养瓶、多功能体液显色培养瓶、尿培养快速培养基、 抗酸杆菌消化液,以及一种既适用于痰细菌培养,又适用于 结核分枝杆菌和抗酸杆菌培养的痰标本液化留置容器。 获国家实用新型专利5项、发明专利1项。主编临床微 生物学专著11部,其中《临床微生物学诊断与图解》获华东 地区科技出版社优秀科技图书一等奖。总主编“医学实验室 I SO15189认可指导丛书”,参编著作3部,以作者发表 论文40余篇。

内容简介

“医学实验室ISO15189认可指导丛书”以CNAS CL02:2012《医学实验室质量和能力 认可准则》为指导,由全国医学检验各专业领域的专家共同编写,对开展ISO15189医学实验 室认可有重要的指导意义和实用价值。 本书共分2篇20章。第一篇为管理要求,主要介绍组织和管理、质量管理和实验室安全 管理等方面的操作程序。第二篇为技术要求,从标本采集、临床标本的细菌学检验、抗菌药物 敏感试验等方面来阐述临床微生物实验室相关操作规程,包括检验前质量管理、实验室仪器设 备、常用培养基及试剂、血清学试验、微生物相关抗体抗原检测、各种染色方法、各种标本的涂 片镜检与培养、常见病原菌及高致病菌检验、手工检验人员比对与仪器性能验证等标准操作规 程。附录部分不仅收录了实验室管理、仪器和设备以及质量控制等方面常用的记录表格,方便 读者直接引用,而且列举了微生物室现场评审不符合项等,有利于读者借鉴和参考,指导作用 突出。 本书内容全面,编排格式规范,言简意赅,指导性强,可作为正在准备或已经通过ISO 15189认可的医院临床微生物实验室的指导书,又可作为基层医院微生物室常规工作的管理 规范和操作手册,还可作为临床微生物专业学习的培训教材。

图书目录

篇管理要求 / 001

章·组织和管理002

节微生物实验室硬件设置及管理程序 / 003

实验室设施和环境条件 / 003

实验室设备管理程序 / 005

实验室试剂及耗材管理程序 / 008

第二节微生物实验室人员岗位设置及管理 / 010

人员配置基本要求 / 010

人员岗位职责设置程序 / 011

人员培训及能力评估程序 / 014

实验室与临床沟通程序 / 016

第二章·质量管理程序017

节质量保证程序 / 018

能力验证活动管理程序 / 018

室内质量控制管理程序 / 020

质量改进程序 / 025

质量风险评估和风险管理程序 / 027

第二节微生物检验方法学性能评价 / 029

微生物检验方法学性能验证程序 / 029

微生物实验室内人员比对程序 / 031

微生物实验室间比对程序 / 032

第三章·安全风险评估与生物防护033

节微生物实验室安全风险评估及管理 / 034

实验室风险评估程序 / 034

二级生物安全管理程序 / 036

疑似高致病性微生物标本管理程序 / 039

第二节微生物实验室生物防护及其管理 / 040

实验室防护和应急管理程序 / 040

菌种管理程序 / 042

危险性化学品使用管理程序 / 043

检验后标本保存和处理程序 / 045

废弃物处理程序 / 046

消毒灭菌管理程序 / 047

职业暴露处理程序 / 048

传染性病原微生物报告的管理程序 / 049

第二篇技术要求 / 051

第四章·检验前质量管理052

节标本采集前程序 / 053

微生物检验项目申请程序 / 053

微生物检验标本条形码程序 / 054

采样前患者识别程序 / 055

第二节标本采集及送检程序 / 056

标本采集、运送、保存程序 / 056

标本接收、标识及信息录入程序 / 060

标本拒收程序 / 061

第五章·微生物实验室仪器设备标准操作规程063

节一般仪器设备的标准操作规程 / 064

恒温培养箱标准操作规程 / 064

CO2培养箱标准操作规程 / 066

厌氧培养系统标准操作规程 / 068

真菌培养箱标准操作规程 / 071

生物安全柜标准操作规程 / 073

普通光学显微镜标准操作规程 / 075

荧光显微镜标准操作规程 / 077

普通冰箱标准操作规程 / 079

低温冰箱标准操作规程 / 080

普通离心机标准操作规程 / 082

Cytospin 4细胞涂片机标准操作规程 / 084

普通移液器标准操作规程 / 086

连续加样移液器标准操作规程 / 088

电热高温接种灭菌器标准操作规程 / 090

旋涡混合器标准操作规程 / 091

恒温水浴箱标准操作规程 / 092

pH计标准操作规程 / 093

游标卡尺标准操作规程 / 095

电子天平标准操作规程 / 096

压力蒸汽灭菌器标准操作规程 / 098

比浊仪标准操作规程 / 100

第二节血培养仪标准操作规程 / 101

BacT/ALERT 3D血培养仪标准操作规程 / 101

BACTEC 9000血培养仪标准操作规程 / 104

BACTEC FX血培养仪标准操作规程 / 107

VersaTREK血培养仪标准操作规程 / 110

DLBt全自动血培养系统标准操作规程 / 113

LABSTAR血培养仪标准操作规程 / 116

AutoBC System全自动血培养系统标准化操作规程 / 119

第三节微生物鉴定仪器标准操作规程 / 121

VITEK 2全自动微生物鉴定仪标准操作规程 / 121

BD Phoenix全自动微生物鉴定仪标准操作规程 / 125

WalkAway系列全自动细菌鉴定和药敏分析仪标准操作规程 / 129

Biofosun微生物鉴定药敏分析系统标准操作规程 / 133

DL96细菌测定系统标准操作规程 / 137

XK细菌鉴定药敏分析系统标准操作规程 / 139

第四节其他仪器标准操作规程 / 142

PREVI Isola全自动平板接种仪标准操作规程 / 142

Probact System自动化细菌分离培养系统标准操作规程 / 145

LARK全自动平板接种仪标准化操作规程 / 147

云鲁合Hawk系列全自动微生物样本处理系统标准操作规程 / 149

MB80微生物快速动态检测标准操作规程 / 151

第六章·常用培养基及试剂标准操作规程154

节培养基标准操作规程 / 155

营养琼脂培养基配制标准操作规程 / 155

血琼脂培养基配制标准操作规程 / 156

巧克力培养基配制标准操作规程 / 157

麦康凯琼脂培养基配制标准操作规程 / 158

TCBS琼脂培养基配制标准操作规程 / 159

淋球菌培养基配制标准操作规程 / 160

MH培养基配制标准操作规程 / 161

HTM培养基配制标准操作规程 / 162

CaryBlair转运培养基配制标准操作规程 / 163

营养肉汤培养基配制标准操作规程 / 164

牛脑心浸液培养基配制标准操作规程 / 165

厌氧血琼脂培养基配制标准操作规程 / 166

L型细菌固体培养基配制标准操作规程 / 167

沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基配制标准操作规程 / 168

第二节常用生化试验标准操作规程 / 169

触酶试验标准操作规程 / 169

氧化酶试验标准操作规程 / 170

凝固酶试验标准操作规程 / 171

DNA酶试验标准操作规程 / 172

CAMP试验标准操作规程 / 173

反向CAMP试验标准操作规程 / 174

β内酰胺酶试验标准操作规程 / 175

新生霉素敏感试验标准操作规程 / 176

Optochin敏感试验标准操作规程 / 177

卫星试验标准操作规程 / 178

嗜血杆菌因子试验标准操作规程 / 179

胆汁溶菌试验标准操作规程 / 180

葡萄糖O/F试验标准操作规程 / 181

克氏双糖铁试验标准操作规程 / 182

三糖铁试验标准操作规程 / 183

七叶苷试验标准操作规程 / 185

吲哚试验标准操作规程 / 186

硝酸盐还原试验标准操作规程 / 187

脲酶试验标准操作规程 / 189

赖氨酸脱羧酶试验标准操作规程 / 190

鸟氨酸脱羧酶试验标准操作规程 / 191

精氨酸双水解酶试验标准操作规程 / 192

苯丙氨酸脱氨酶试验标准操作规程 / 193

枸橼酸盐利用试验标准操作规程 / 194

丙二酸盐利用试验标准操作规程 / 195

硫化氢试验标准操作规程 / 196

4%氢氧化钾拉丝试验标准操作规程 / 197

第七章·血清学试验标准操作规程198

节肠道致病菌血清学试验标准操作规程 / 199

沙门菌血清学检测标准操作规程 / 199

志贺菌血清学检测标准操作规程 / 200

致病性大肠埃希菌血清学检测标准操作规程 / 201

O157:H7出血性大肠埃希菌血清学检测标准操作规程 / 202

O1群、O139群霍乱弧菌血清学检测标准操作规程 / 203

第二节其他血清学试验标准操作规程 / 204

链球菌血清学检测标准操作规程 / 204

第八章·微生物相关抗体抗原检测标准操作规程205

节微生物相关抗体检测标准操作规程 / 206

结核分枝杆菌抗体血清学检测标准操作规程 / 206

军团菌抗体检测标准操作规程 / 208

肺炎支原体抗体检测标准操作规程 / 209

人型支原体抗体检测标准操作规程 / 210

解脲脲原体抗体检测标准操作规程 / 211

梅毒反应素抗体检测标准操作规程 / 212

梅毒密螺旋体抗体检测标准操作规程 / 213

肥达反应标准操作规程 / 214

冷凝集试验标准操作规程 / 216

第二节微生物相关抗原检测标准操作规程 / 217

沙眼衣原体抗原检测标准操作规程 / 217

隐球菌抗原乳胶凝集试验标准操作规程 / 218

隐球菌抗原检测标准操作规程 / 219

尿肺炎链球菌抗原检测标准操作规程 / 221

细菌性阴道炎唾液酸酶检测标准操作规程 / 222

第九章·各种染色方法标准操作规程223

节细菌染色标准操作规程 / 224

革兰染色标准操作规程 / 224

瑞氏染色标准操作规程 / 226

抗酸染色标准操作规程 / 227

荧光染色标准操作规程 / 229

鞭毛染色标准操作规程 / 231

潘本汉染色标准操作规程 / 232

第二节真菌染色标准操作规程 / 233

耶氏肺孢子菌瑞氏吉姆萨染色标准操作规程 / 233

隐孢子菌——改良抗酸染色标准操作规程 / 235

墨汁染色标准操作规程 / 236

乳酸酚棉蓝染色标准操作规程 / 237

过碘酸希夫染色标准操作规程 / 238

六胺银染色标准操作规程 / 240

真菌钙荧光白染色标准操作规程 / 242

真菌KOH压片标准操作规程 / 243

第十章·各种标本的涂片镜检与培养标准操作规程245

节各种标本的涂片镜检标准操作规程 / 246

脑脊液涂片标准操作规程 / 246

粪便涂片标准操作规程 / 247

穿刺液涂片标准操作规程 / 248

脓液及伤口分泌物涂片标准操作规程 / 249

褥疮溃疡标本涂片标准操作规程 / 250

尿标本涂片标准操作规程 / 251

生殖系统标本涂片标准操作规程 / 252

前列腺分泌物涂片标准操作规程 / 253

痰标本涂片标准操作规程 / 254

支气管肺泡灌洗液、保护毛刷标本涂片标准操作规程 / 256

鼻腔、鼻咽、咽喉分泌物涂片标准操作规程 / 257

眼部分泌物涂片标准操作规程 / 258

耳分泌物涂片标准操作规程 / 259

口腔标本涂片标准操作规程 / 260

胃液标本涂片标准操作规程 / 261

第二节各种类型标本培养标准操作规程 / 262

血液及骨髓标本培养标准操作规程 / 262

脑脊液标本培养标准操作规程 / 266

痰、支气管肺泡灌洗液、保护毛刷标本培养标准操作规程 / 269

鼻腔、鼻咽、咽喉分泌物标本培养标准操作规程 / 277

眼部标本培养标准操作规程 / 280

耳部标本培养标准操作规程 / 282

穿刺液标本培养标准操作规程 / 284

引流液标本培养标准操作规程 / 287

尿液标本培养标准操作规程 / 289

生殖道标本培养标准操作规程 / 293

粪便标本培养标准操作规程 / 296

脓及伤口标本培养标准操作规程 / 299

褥疮溃疡标本培养标准操作规程 / 302

中心静脉导管标本培养标准操作规程 / 304

组织标本培养标准操作规程 / 307

前列腺标本培养标准操作规程 / 310

人体植入物标本培养标准操作规程 / 313

腹透液标本培养标准操作规程 / 316

第十一章·常见病原菌及高致病菌检验标准操作规程318

节常见病原菌检验标准操作规程 / 319

葡萄球菌属检验标准操作规程 / 319

微球菌属检验标准操作规程 / 322

链球菌属检验标准操作规程 / 324

肠球菌属检验标准操作规程 / 327

奈瑟菌属检验标准操作规程 / 329

卡他莫拉菌检验标准操作规程 / 331

棒状杆菌属检验标准操作规程 / 333

李斯特菌属检验标准操作规程 / 335

丹毒丝菌属检验标准操作规程 / 337

诺卡菌属检验标准操作规程 / 339

马杜拉放线菌属检验标准操作规程 / 341

埃希菌属检验标准操作规程 / 343

致病性大肠埃希菌检验标准操作规程 / 345

沙门菌属检验标准操作规程 / 347

志贺菌属检验标准操作规程 / 349

克雷伯菌属检验标准操作规程 / 351

肠杆菌属检验标准操作规程 / 353

沙雷菌属检验标准操作规程 / 355

变形杆菌属检验标准操作规程 / 357

摩根菌属检验标准操作规程 / 359

枸橼酸杆菌属检验标准操作规程 / 361

耶尔森菌属检验标准操作规程 / 363

副溶血弧菌检验标准操作规程 / 365

邻单胞菌属检验标准操作规程 / 367

气单胞菌属检验标准操作规程 / 369

假单胞菌属检验标准操作规程 / 371

产碱杆菌属检验标准操作规程 / 373

不动杆菌属检验标准操作规程 / 375

色杆菌属检验标准操作规程 / 377

金黄杆菌属检验标准操作规程 / 379

莫拉菌属检验标准操作规程 / 381

嗜血杆菌属检验标准操作规程 / 383

军团菌属检验标准操作规程 / 385

弯曲菌属检验标准操作规程 / 387

螺杆菌属检验标准操作规程 / 389

第二节高致病菌检验标准操作规程 / 391

布鲁菌属检验标准操作规程 / 391

弗朗西斯菌属检验标准操作规程 / 393

鼠疫耶尔森菌检验标准操作规程 / 395

霍乱弧菌检验标准操作规程 / 397

炭疽芽孢杆菌检验标准操作规程 / 399

第十二章·抗菌药物敏感试验标准操作规程401

节抑菌试验标准操作规程 / 402

KB法标准操作规程 / 402

稀释法标准操作规程 / 405

浓度梯度扩散法(Etest)标准操作规程 / 406

棋盘格法联合药敏试验标准操作规程 / 407

第二节临床常见菌抗菌药物敏感试验标准操作规程 / 408

肠杆菌科纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 408

假单胞菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 409

不动杆菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 410

嗜麦芽窄食单胞菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 411

洋葱伯克霍尔德菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 412

葡萄球菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 413

肠球菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 414

链球菌属纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 415

脑膜炎奈瑟菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 417

淋病奈瑟菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 418

流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程 / 419

产色素头孢菌素试验标准操作规程 / 420

超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程 / 421

耐甲氧西林葡萄球菌纸片扩散法筛选试验标准操作规程 / 423

耐万古霉素肠球菌筛选试验标准操作规程 / 424

诱导性β内酰胺酶试验标准操作规程 / 425

诱导性克林霉素耐药试验标准操作规程 / 426

改良Hodge试验标准操作规程 / 427

第十三章·分枝杆菌实验诊断标准操作规程428

标本采集及处理标准操作规程 / 429

抗酸杆菌涂片镜检标准操作规程 / 431

分枝杆菌属检验标准操作规程 / 433

快速生长分枝杆菌检验标准操作规程 / 436

第十四章·厌氧菌检验标准操作规程438

标本采集及处理标准操作规程 / 439

厌氧菌检验标准操作规程 / 441

第十五章·临床真菌标本实验诊断标准操作规程445

节真菌标本采集及检验标准操作规程 / 446

标本采集及处理标准操作规程 / 446

真菌涂片标准操作规程 / 448

第二节真菌常用鉴定方法标准操作规程 / 451

透明胶带法丝状菌镜检标准操作规程 / 451

真菌小培养标准操作规程 / 452

第三节真菌药物敏感试验标准操作规程 / 454

念珠菌药敏试验标准操作规程 / 454

真菌Etest药敏试验标准操作规程 / 456

ATB FUNGUS 3标准操作规程 / 460

第十六章·非培养辅助检测标准操作规程461

节细菌非培养辅助检测标准操作规程 / 462

革兰阴性菌脂多糖检测标准操作规程 / 462

降钙素原(PCT)检测标准操作规程 / 464

C反应蛋白(CRP)检测标准操作规程 / 467

第二节真菌非培养辅助检测标准操作规程 / 469

真菌β(1,3)D葡聚糖检测标准操作规程 / 469

曲霉菌半乳甘露聚糖检测标准操作规程 / 471

隐球菌荚膜多糖检测标准操作规程 / 474

第十七章·质谱及分子生物学鉴定标准操作规程477

节细菌及真菌测序鉴定标准操作程序 / 478

细菌16Sr DNA测序鉴定标准操作程序 / 478

真菌ITS/D2测序鉴定标准操作程序 / 481

第二节质谱鉴定细菌及酵母菌标准操作规程 / 484

MALDITOFMS质谱鉴定细菌及酵母菌标准操作规程 / 484

第十八章·检验程序性能验证486

节显微镜检查的性能验证 / 487

浓缩标本显微镜检查性能验证 / 487

非浓缩标本显微镜检查性能验证 / 489

第二节显微镜检查的人员比对 / 490

革兰染色涂片检查人员比对 / 490

抗酸染色涂片检查人员比对 / 492

特殊染色涂片检查人员比对 / 494

痰标本质量评估人员比对 / 496

第三节血培养仪性能验证 / 498

血培养仪性能验证 / 498

A血培养仪与B血培养仪性能比对 / 502

第四节一般培养性能验证及人员比对 / 504

一般培养的性能验证 / 504

结核分枝杆菌培养的性能验证 / 506

标本分离培养人员比对 / 508

标本定量培养计数人员比对 / 510

培养结果判读人员比对 / 512

第五节选择性平板性能验证 / 514

XLD琼脂平板性能验证 / 514

SS琼脂平板性能验证 / 515

麦康凯琼脂平板性能验证 / 516

巧克力琼脂平板性能验证 / 517

第六节非选择性平板性能验证 / 518

血琼脂平板性能验证 / 518

沙保弱琼脂平板性能验证 / 519

第七节临床微生物鉴定程序性能验证 / 520

微生物鉴定仪性能验证 / 520

MALDITOFMS质谱仪性能验证 / 522

定量接种环性能验证 / 524

志贺菌血清学试验性能验证 / 526

沙门菌血清学试验性能验证 / 527

致病性大肠埃希菌血清学试验性能验证 / 528

O157:H7出血性大肠埃希菌血清学试验性能验证 / 529

第八节血清学试验人员比对 / 530

志贺菌血清学试验人员比对 / 530

沙门菌血清学试验人员比对 / 532

致病性大肠埃希菌血清学试验人员比对 / 534

O1群、O139群霍乱弧菌血清学试验人员比对 / 536

第九节药敏试验的性能验证 / 538

全自动微生物药敏试验性能验证 / 538

KB法药敏试验性能验证 / 540

KB法药敏试验测量抑菌圈直径人员比对 / 542

第十节不同仪器/方法的性能比对 / 544

A微生物鉴定和药敏仪与B微生物鉴定和药敏仪性能验证比对 / 544

质谱仪与自动微生物鉴定仪比对 / 550

第十九章·检验后结果报告及资料处理程序552

节报告程序 / 553

结果报告程序 / 553

危急值报告程序 / 555

第二节结果发布标准程序 / 556

分级报告程序 / 556

传染病报告程序 / 557

更改报告程序 / 558

细菌耐药监测与上报程序 / 559

第二十章·菌种保存程序560

需氧菌种保存程序 / 561

厌氧菌种保存程序 / 563

结核分枝杆菌保存程序 / 564

真菌菌种保存程序 / 565

附录566

一、 实验室记录表格 / 567

二、 现场评审不符合项举例 / 602