细胞培养与细胞水平筛选(杨华军)

细胞培养与细胞水平筛选(杨华军)
作 者: 杨华军 程炜
出版社: 化学工业出版社
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作者简介

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内容简介

《细胞培养与细胞水平筛选》为新型活页式教材。本书聘请了生物医药行业企业一线的专家参与教材编写,使内容更符合企业生产工作实际。全书以一个来源于行业的真实工作项目“细胞水平药物筛选实验”为基础,设计了八个学习情境。每个学习情境环环相扣、层层递进,可使学生在学习相关理论知识和实验操作的基础上,更了解企业实际工作的类型和关注点。本书可作为高等职业教育生物技术类相关专业的教材,也可供相关行业企业人员培训和参考使用。

图书目录

学习情境一 接受任务,任务前信息收集 001

情境描述 001

学习目标 001

任务书 001

任务分组 002

工作计划 002

任务实施 003

评价反馈 004

相关知识 005

一、EGFR背景知识 005

1.药物靶点 005

2.EGFR简介 005

3.EGFR抑制剂 006

二、实验方案讨论结果案例 009

学习情境二 实验设施和实验设备 010

情境描述 010

学习目标 010

任务书 010

任务分组 010

工作计划 011

任务实施 012

评价反馈 014

相关知识 015

一、细胞培养实验室生物安全 015

二、细胞培养实验室的设备 015

1.超净工作台、生物安全柜 016

2.细胞培养箱 017

3.恒温水浴锅 018

4.台式离心机 018

5.冰箱和冰柜 019

6.细胞计数器 020

7.倒置显微镜 020

8.液氮罐 020

9.高压灭菌锅 020

三、试剂和耗材 021

1.细胞培养容器 021

2.吸管和移液器 022

3.离心管和细胞冻存管 023

4.细胞消化液 024

5.基础培养基 024

6.血清 025

7.抗生素 025

四、无菌技术 026

1.无菌工作区域 026

2.良好的个人卫生 026

3.无菌试剂和培养基 026

4.无菌操作 026

学习情境三 细胞的复苏与冻存 028

情境描述 028

学习目标 028

任务书 028

任务分组 028

工作计划 029

任务实施 030

评价反馈 032

相关知识 033

一、液氮罐的使用 033

1.液氮的来源 033

2.液氮的特性 033

3.液氮使用注意事项 034

二、NCI-H1975细胞的复苏 034

1.NCI-H1975细胞的相关信息 034

2.美国模式培养物集存库 035

3.复苏NCI-H1975细胞的实验设备、试剂和耗材 035

4.复苏NCI-H1975细胞的实验流程 035

5.冻存NCI-H1975细胞的实验设备、试剂和耗材 037

6.冻存NCI-H1975细胞的实验流程 037

学习情境四 细胞的传代培养与观察 038

情境描述 038

学习目标 038

任务书 038

任务分组 038

工作计划 039

任务实施 041

评价反馈 043

相关知识 044

一、细胞的常规观察 044

1.细胞形态 044

2.细胞生长 045

3.营养液 046

4.生物污染 046

二、NCI-H1975细胞的传代培养 049

1.传代时间的确定 049

2.NCI-H1975细胞传代所需的实验设备、试剂和耗材 049

3.NCI-H1975细胞传代实验流程 049

4.悬浮细胞的传代 050

三、细胞数目和细胞存活率的测定 050

1.血球计数板的基本构造 050

2.使用血球计数板进行细胞数目和存活率的测定 051

学习情境五 细胞铺板及铺板密度的确定 052

情境描述 052

学习目标 052

任务书 052

任务分组 052

工作计划 053

任务实施 054

评价反馈 055

相关知识 056

一、细胞铺板 056

二、细胞梯度稀释观察法 058

三、细胞梯度稀释生长曲线法 059

学习情境六 细胞铺板和药物处理 061

情境描述 061

学习目标 061

任务书 061

任务分组 061

工作计划 062

任务实施 063

评价反馈 064

相关知识 066

一、细胞铺板 066

二、药物处理 066

1.药物储存液的配制 066

2.测试药物的梯度稀释 067

3.药物处理 068

学习情境七 实验结果的检测 069

情境描述 069

学习目标 069

任务书 069

任务分组 069

工作计划 070

任务实施 071

评价反馈 073

相关知识 074

一、实验结果的检测 074

1.CellTiter-Glo?细胞活力检测法 074

2.MTT法 075

3.CCK-8法 076

二、多功能酶标仪的使用 078

学习情境八 实验数据的处理和呈现 079

情境描述 079

学习目标 079

任务书 079

任务分组 079

工作计划 080

任务实施 081

评价反馈 083

相关知识 084

一、测试药物对细胞活性抑制率的计算 084

二、GraphPad Prism绘制量效曲线并计算IC50值 085

三、绝对IC50和相对IC50 090

四、实验结果呈现 091

参考文献 092