石榴皮多酚及其在慢性炎症调节中的应用

第1章绪论001

1.1石榴皮多酚的组成和生物活性003

1.1.1石榴简介003

1.1.2石榴皮多酚及其主要活性成分004

1.1.3石榴皮多酚的生物活性008

1.2炎症反应013

1.2.1炎症反应进程014

1.2.2巨噬细胞015

1.2.3TLR4与LPS017

1.2.4炎性介质和促炎细胞因子018

1.2.5NF-κB通路020

1.2.6MAPK通路022

第2章石榴皮多酚对体外炎症反应的调节作用027

2.1石榴皮多酚的组成030

2.1.1样品制备030

2.1.2多酚组成的测定方法030

2.1.3PPPs组成成分的HPLC分析031

2.2PPPs对巨噬细胞活力的影响032

2.2.1巨噬细胞与炎症反应的关系032

2.2.2细胞培养技术034

2.2.3PPPs对巨噬细胞活力的影响037

2.2.4试验分组及处理041

2.3PPPs对LPS诱导巨噬细胞ROS生成的调节作用042

2.4PPPs对促炎因子和炎性介质基因表达的调节作用044

2.4.1基因表达的测定方法045

2.4.2LPS作用时间对促炎细胞因子基因表达的影响051

2.4.3PPPs对促炎细胞因子mRNA表达量的调节作用052

2.4.4PPPs对促炎细胞因子分泌量的调节作用055

2.5PPPs对炎性介质的调节作用058

2.5.1炎性介质的测定方法058

2.5.2PPPs对炎性介质NO/PGE2分泌和iNOS/COX-2mRNA表达的影响059

2.6讨论061

2.7本章小结064

第3章石榴皮多酚调控炎症反应的分子机制067

3.1Western blot技术检测巨噬细胞总蛋白、核蛋白和胞浆蛋白070

3.1.1总蛋白的分离与测定071

3.1.2核蛋白与胞浆蛋白的分离与测定071

3.1.3SDS-PAGE凝胶的制备073

3.1.4聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）074

3.1.5转膜074

3.1.6免疫反应075

3.1.7显色075

3.2石榴皮多酚对细胞受体的调节作用076

3.2.1测定方法076

3.2.2LPS作用时间对巨噬细胞TLR4 mRNA表达的影响078

3.2.3PPPs对TLR4受体表达的调节作用078

3.3PPPs对NF-κB炎症通路的调节作用082

3.3.1测定方法083

3.3.2PPPs对NF-κB和p65基因表达及IκB磷酸化的调节作用085

3.3.3PPPs对p65核转移和NF-κB炎症通路激活的调节作用089

3.3.4PPPs对IκBα泛素化降解的调节作用092

3.4PPPs对MAPK炎症通路的调节作用095

3.4.1测定方法095

3.4.2PPPs对MAPK通路的调节作用096

3.4.3PPPs对iNOS和COX-2蛋白表达的调节作用099

3.5讨论101

3.6本章小结106

第4章石榴皮多酚对代谢综合征的调节作用107

4.1动物实验110

4.1.1实验动物及饲料110

4.1.2实验动物的分组及处理111

4.2PPPs对MS大鼠的调节作用113

4.2.1实验方法113

4.2.2PPPs对MS大鼠体重和摄食量的影响114

4.2.3PPPs对MS大鼠血脂的调节作用115

4.2.4PPPs对MS大鼠血糖、转氨酶和FFA的调节作用116

4.2.5PPPs对MS大鼠血清CRP的调节作用118

4.3PPPs对MS大鼠肝脏的保护作用119

4.3.1PPPs对MS大鼠肝脂和肝重指数的调节作用119

4.3.2PPPs对MS大鼠肝脏MPO的调节作用120

4.3.3PPPs对MS大鼠肝脏外观的改变121

4.3.4PPPs对MS大鼠肝脏病理学的改变122

4.4PPPs对MS大鼠慢性炎症的调节作用124

4.4.1实验方法124

4.4.2PPPs对MS大鼠炎性介质的调节作用126

4.4.3PPPs对MS大鼠促炎细胞因子的调节作用128

4.4.4PPPs对MS大鼠肝脏中炎性介质和促炎细胞因子的基因表达的调节作用132

4.5PPPs对MS大鼠炎症调节的分子通路135

4.5.1实验方法135

4.5.2PPPs对MS大鼠NF-κB通路的调节作用136

4.5.3PPPs对MS大鼠MAPK通路的调节作用138

4.6讨论140

4.7本章小结143

第5章结论145

5.1本研究结论147

5.2本研究的主要创新点148

5.3本研究的不足及展望149

参考文献150

附录缩写词中英文对照表165