生命早期1000天营养改善与应用前沿：母乳成分分析方法

第1章　概论 001

1.1　母乳成分研究的重要意义 002

1.1.1　国际母乳成分相关研究 002

1.1.2　国内母乳成分相关研究 003

1.1.3　研究母乳成分的必要性 003

1.1.4　母乳中功能性特征成分的作用 004

1.1.5　母乳成分研究需要监测污染物 004

1.2　母乳中营养成分的组成及存在形式 004

1.2.1　宏量营养素 005

1.2.2　脂溶性维生素 005

1.2.3　水溶性维生素 006

1.2.4　矿物质 007

1.3　母乳中营养成分的测定方法 008

1.3.1　宏量营养素、核苷与核苷酸、总能量的测定方法 008

1.3.2　脂溶性维生素的测定方法 009

1.3.3　水溶性维生素的测定方法 010

1.3.4　矿物元素的测定方法 011

1.4　母乳中环境污染物的影响 011

1.5　展望 012

1.5.1　建立中国母乳成分数据库 012

1.5.2　持续探究母乳喂养的近期影响与远期效应 012

1.5.3　系统布局母乳营养成分的代谢组学研究 013

1.5.4　研究母乳中痕量生物活性成分以及功能性特征成分 013

1.5.5　加强母乳中环境污染物的研究 013

1.5.6　进行方法学研究 013

参考文献 013

第2章　母乳代谢组学 017

2.1　概述 018

2.1.1　代谢组学的概念及应用范围 018

2.1.2　代谢组的概念及应用范围 019

2.1.3　母乳代谢组学的概念及应用范围 019

2.1.4　母乳代谢组学研究内容 019

2.1.5　母乳代谢组学研究举例 020

2.2　母乳中的代谢产物 021

2.2.1　母乳代谢组学研究概况 021

2.2.2　LC-MS和GC-MS技术的应用 024

2.2.3　1H NMR光谱的应用 024

2.3　基于NMR与MS的代谢组学 025

2.4　影响母乳代谢组的因素 027

2.4.1　胎龄和哺乳期对母乳代谢组的影响 027

2.4.2　特定地理位置对母乳代谢组的影响 028

2.4.3　疾病状态对母乳代谢组的影响 029

2.5　展望 030

参考文献 031

第3章　母乳蛋白质组学 035

3.1　概述 036

3.1.1　蛋白质组学的基本概念 036

3.1.2　广义蛋白质组学的概念 036

3.1.3　母乳蛋白质组学的概念 036

3.1.4　母乳蛋白质组学的研究内容 036

3.2　母乳蛋白质组学的检测方法、种类和影响因素 037

3.2.1　母乳蛋白质组学的检测方法 037

3.2.2　母乳不同种类蛋白质的组学研究 037

3.2.3　母乳蛋白质组学研究的影响因素 039

3.3　乳脂肪球膜与外泌体的蛋白质组学研究 039

3.4　多肽组学 040

3.5　展望 041

参考文献 041

第4章　母乳脂质组学 045

4.1　概述 046

4.1.1　脂质组学的研究目标 046

4.1.2　脂质组学的研究内容 046

4.1.3　母乳脂质组学的概念 046

4.2　脂质组学技术 047

4.2.1　脂质的提取方法和分离技术 047

4.2.2　脂质的定性和定量测定技术 048

4.3　母乳脂质组学的研究内容 051

4.3.1　母乳脂质组成与检测 051

4.3.2　母乳脂肪酸组成与检测 053

4.3.3　母乳甘油三酯组成与检测 054

4.3.4　母乳磷脂组成与检测 058

4.3.5　母乳胆固醇组成与检测 059

4.4　展望 060

参考文献 061

第5章　母乳糖组学 065

5.1　概述 066

5.1.1　聚糖的概念 066

5.1.2　聚糖的作用 066

5.1.3　聚糖的多样化 067

5.1.4　糖缀合物的概念 067

5.1.5　糖组的概念 068

5.1.6　糖组学的概念 068

5.1.7　母乳糖组学的概念 069

5.1.8　糖组学与其他组学的协同分析 070

5.2　母乳糖蛋白及其在疾病预防中的作用 070

5.2.1　分泌型免疫球蛋白A的概念与作用 071

5.2.2　乳铁蛋白的概念与作用 071

5.2.3　κ-酪蛋白的概念与作用 072

5.2.4　乳脂肪球膜蛋白的概念与作用 072

5.3　母乳糖脂及其在疾病预防中的作用 074

5.3.1　母乳中神经节苷脂含量与存在形式 074

5.3.2　母乳糖脂对胃肠道病原体黏附的影响 075

5.3.3　母乳糖脂对致病菌产生毒素的影响 076

5.3.4　母乳糖脂对病毒活性的影响 076

5.4　母乳寡糖及其在疾病预防中的作用 077

5.4.1　母乳寡糖简介 077

5.4.2　母乳糖组对共生菌的影响 077

5.4.3　HMOs介导的对致病菌的防御作用 078

5.5　糖复合物益生潜力以及产品的研发 081

5.5.1　母乳糖复合物的益生潜力 081

5.5.2　牛乳糖复合物的抗菌潜力 081

5.5.3　母乳糖复合物研究的未来方向 083

5.6　糖组学的研究方法 083

5.6.1　糖捕捉法 084

5.6.2　微阵列技术 084

5.6.3　化学选择糖印迹技术 084

5.6.4　双消化并串联柱法 085

5.7　展望 085

5.7.1　聚糖和聚糖结合蛋白的多样性研究 085

5.7.2　糖蛋白的分离与检测技术 086

5.7.3　糖链结构的测定 086

5.7.4　HMOs的抗菌活性及作用方式 086

5.7.5　糖组学研究方法的创新 087

参考文献 087

第6章　母乳微生物组学 093

6.1　概述 094

6.1.1　微生物组学概念 094

6.1.2　母乳微生物组学概念 094

6.1.3　母乳中微生物多样性 094

6.1.4　母乳微生物组学研究目的 095

6.2　不同喂养方式对婴儿肠道微生物组的影响 095

6.2.1　母乳喂养与婴儿配方食品喂养对婴儿的肠道细菌菌群组成的影响 096

6.2.2　微生物代谢组学的比较 096

6.3　影响母乳微生物组的潜在因素 098

6.3.1　分娩方式与喂养方式 098

6.3.2　胎儿发育成熟程度 099

6.3.3　哺乳阶段 099

6.3.4　抗生素的使用 099

6.3.5　乳母的健康状况 099

6.3.6　生存地理环境 100

6.3.7　乳母膳食与营养状况 100

6.4　调节母乳微生物组的潜在意义 100

6.4.1　动物模型试验结果 100

6.4.2　影响婴儿肠道益生菌定植 101

6.4.3　益生菌的预防作用 101

6.5　展望 101

参考文献 102

第7章　母乳中蛋白质及其组分测定 107

7.1　总蛋白质及其组分研究 108

7.1.1　总蛋白质含量 108

7.1.2　不同蛋白质组分 108

7.1.3　蛋白质组分的方法学研究进展 109

7.2　不同蛋白质组分测定方法 109

7.2.1　α-乳清蛋白的测定方法 109

7.2.2　β-酪蛋白的测定方法 110

7.2.3　乳肽的测定方法 111

7.2.4　乳铁蛋白的测定方法 112

7.2.5　免疫球蛋白的测定方法 114

7.2.6　骨桥蛋白的测定方法 117

7.2.7　乳脂肪球膜蛋白组学的测定方法 117

7.3　氨基酸含量测定方法 117

7.3.1　氨基酸自动分析法 119

7.3.2　高效液相色谱法 119

7.3.3　气相色谱法 120

7.3.4　色谱质谱联用法 120

参考文献 120

第8章　母乳中脂质及其组分测定 125

8.1　脂质的概念 126

8.1.1　脂肪 126

8.1.2　磷脂 126

8.1.3　胆固醇 126

8.1.4　神经酸 126

8.1.5　反式脂肪酸 126

8.2　母乳脂质的提取方法 127

8.2.1　碱水解法 127

8.2.2　酸水解法 127

8.2.3　氯仿-甲醇法 128

8.3　母乳脂质分析方法 128

8.3.1　母乳脂肪酸的分析方法 128

8.3.2　母乳甘油三酯的分析方法 128

8.3.3　母乳磷脂的分析方法 129

8.3.4　母乳胆固醇的分析方法 129

8.3.5　母乳脂质组学分析方法 130

8.3.6　乳脂肪球膜的提取及成分测定 130

8.4　中链脂肪酸的测定方法 131

8.4.1　气相色谱法 132

8.4.2　气相色谱-质谱联用 132

8.4.3　薄层色谱法 133

参考文献 133

第9章　母乳中碳水化合物及其组分测定 135

9.1　碳水化合物的概念及测定方法 136

9.1.1　总碳水化合物的测定 136

9.1.2　乳糖的测定 136

9.1.3　单糖的测定 138

9.2　低聚糖/寡糖的概念及测定方法 138

9.2.1　色谱分析技术 138

9.2.2　电泳技术 139

9.2.3　多种检测技术的联合应用 139

9.2.4　可检测的低聚糖 139

9.3　核磁共振代谢组学 140

9.4　展望 140

参考文献 140

第10章　母乳中微量生物活性成分测定 143

10.1　核苷和核苷酸 144

10.1.1　核苷和核苷酸的测定方法 144

10.1.2　游离核苷和核苷酸的测定方法 144

10.1.3　总的潜在可利用核苷（TPAN） 145

10.2　补体成分 145

10.2.1　总补体溶血活性测定 145

10.2.2　补体成分含量测定 146

10.2.3　补体成分测定的经典方法 146

10.3　唾液酸 147

10.3.1　 唾液酸的传统检测方法 147

10.3.2　色谱与质谱法 147

10.4　其他微量成分 148

10.4.1　母乳microRNA或miRNA 148

10.4.2　溶菌酶 149

10.4.3　细胞因子 149

10.4.4　激素及类激素成分 150

参考文献 150

第11章　母乳成分快速分析仪的应用 153

11.1　母乳成分快速分析仪的概念 154

11.2　母乳成分快速分析仪测定结果与传统方法的比较 154

11.2.1　相关性分析 154

11.2.2　蛋白质含量测定的比较 155

11.2.3　脂肪含量测定的比较 155

11.2.4　乳糖含量测定的比较 155

11.2.5　总固形物含量测定的比较 156

11.3　HMA的应用 156

11.3.1　适用范围 156

11.3.2　临床应用 156

11.3.3　现场调查 157

11.3.4　需要注意的问题 157

参考文献 158

第12章　母乳中细菌检测方法 159

12.1　传统培养基法与不依赖培养基法的比较 160

12.2　分子生物学分析方法的应用 160

12.3　展望 162

参考文献 163

第13章　母乳的物理特性 165

13.1　感官特征 166

13.1.1　气味 166

13.1.2　味道 166

13.1.3　颜色、稠度、口感 167

13.2　渗透压 167

13.2.1　正常值 167

13.2.2　营养学意义 168

13.2.3　影响渗透压的因素 169

13.3　电导率 169

13.3.1　正常值 169

13.3.2　营养学意义 170

13.3.3　影响电导率的因素 170

13.4　其他物理参数 170

13.4.1　冰点与沸点 170

13.4.2　密度 171

13.4.3　表面张力 171

13.4.4　分散性 171

13.4.5　pH值和酸度 172

参考文献 172

第14章　母乳中α-乳白蛋白含量测定 175

14.1　乳白蛋白测定的材料与方法 176

14.1.1　试剂 176

14.1.2　仪器工作条件 177

14.1.3　标准曲线溶液的配制 177

14.1.4　母乳酶解 178

14.2　乳白蛋白测定的结果与讨论 178

14.2.1　特异性多肽的选择 178

14.2.2　内标的选择 179

14.2.3　方法学验证 180

14.2.4　母乳样品含量以及与市售婴儿配方乳粉的比较 180

14.3　结论 181

参考文献 181

第15章　母乳中乳铁蛋白含量测定 183

15.1　乳铁蛋白测定的材料与方法 184

15.1.1　化学试剂 184

15.1.2　母乳样品采集 185

15.1.3　合成肽标准品 185

15.1.4　前处理方法 185

15.1.5　液相色谱条件 185

15.1.6　质谱条件 186

15.1.7　方法学验证 186

15.2　乳铁蛋白测定的结果与讨论 187

15.2.1　母乳乳铁蛋白的特征肽和内标 187

15.2.2　靶向特征肽的选择 187

15.2.3　前处理方法的优化 189

15.2.4　方法学验证 190

15.2.5　方法应用 191

15.3　结论 192

参考文献 193

第16章　母乳中胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸测定 195

16.1　胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸测定的材料与方法 196

16.1.1　仪器设备 196

16.1.2　试剂与标准品 196

16.1.3　储备液配制 196

16.1.4　样品预处理 197

16.1.5　分析检测条件 197

16.2　胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸测定的结果与讨论 198

16.2.1　色谱条件的优化 198

16.2.2　样品预处理方法的优化 200

16.2.3　方法学验证 200

16.2.4　实际样品检测结果 202

16.3　结论 202

参考文献 202

第17章　母乳中水解氨基酸含量测定 205

17.1　水解氨基酸测定的材料与方法 206

17.1.1　仪器与试剂 206

17.1.2　溶液配制 207

17.1.3　母乳样品采集、来源、保存条件 207

17.1.4　样品预处理方法 207

17.1.5　衍生及分析 207

17.2　水解氨基酸测定的结果与讨论 208

17.2.1　UPLC法色谱柱的选择 208

17.2.2　UPLC法流动相的优化 208

17.2.3　方法学验证 210

17.2.4　两种方法的对比 210

17.2.5　母乳中含量 211

17.3　结论 212

参考文献 213

第18章　母乳中矿物质含量测定 215

18.1　食物中矿物质含量检测方法 216

18.1.1　光谱法 217

18.1.2　质谱法 217

18.1.3　色谱法 217

18.1.4　电化学分析法 218

18.2　ICP-MS应用于母乳矿物质含量分析实例 218

18.2.1　材料与方法 218

18.2.2　结果与讨论 221

18.2.3　方法学分析 223

18.2.4　结论 224

18.3　展望 225

参考文献 225

第19章　母乳中维生素和类维生素测定 229

19.1　理化特点及其功能 230

19.1.1　脂溶性维生素 230

19.1.2　水溶性维生素 230

19.2　脂溶性维生素测定方法 231

19.2.1　脂溶性维生素检测前准备 231

19.2.2　维生素A和类胡萝卜素的测定 232

19.2.3　维生素D的测定 233

19.2.4　维生素E的测定 234

19.2.5　维生素K的测定 235

19.3　水溶性维生素测定方法 236

19.3.1　水溶性维生素一般测定方法 236

19.3.2　其他水溶性维生素测定方法 238

19.4　展望 239

19.4.1　脂溶性维生素 239

19.4.2　水溶性维生素 240

参考文献 240

第20章　母乳中持久性有机氯农药含量测定 245

20.1　持久性有机氯农药测定的材料与方法 246

20.1.1　仪器 246

20.1.2　试剂 246

20.1.3　实验方法 246

20.2　持久性有机氯农药测定的结果与讨论 248

20.2.1　前处理方法 248

20.2.2　方法学验证 249

20.2.3　加标回收率 250

20.2.4　母乳中含量 251

20.3　结论 252

参考文献 252

第21章　母乳中二英及其类似物含量测定 255

21.1　二英及其类似物测定的仪器与试剂 256

21.1.1　仪器 256

21.1.2　试剂 257

21.2　母乳样品采集 261

21.3　二英及其类似物测定的实验方法 261

21.3.1　样品前处理 261

21.3.2　仪器分析条件 264

21.3.3　结果计算 267

21.4　二英及其类似物测定的结果与讨论 270

21.4.1　方法验证 270

21.4.2　定量内标回收率 270

21.4.3　母乳中含量 271

21.5　结论 272

参考文献 273

第22章　母乳中全氟化合物含量测定 275

22.1　全氟化合物测定的仪器与试剂 276

22.1.1　仪器 276

22.1.2　试剂 276

22.2　母乳样本采集 277

22.3　全氟化合物测定的实验方法 278

22.3.1　样本前处理 278

22.3.2　仪器分析条件 278

22.3.3　定性定量方法 278

22.4　全氟化合物测定的结果与讨论 279

22.4.1　前处理方法优化 279

22.4.2　仪器分析方法优化 280

22.4.3　方法学验证 281

22.4.4　母乳中含量 282

22.5　结论 283

参考文献 284

第23章　母乳中有机磷阻燃剂含量测定 285

23.1　有机磷阻燃剂测定的材料与方法 286

23.1.1　仪器 286

23.1.2　试剂 286

23.1.3　实验方法 287

23.1.4　母乳样本采集 289

23.2　有机磷阻燃剂测定的结果与讨论 290

23.2.1　前处理方法 290

23.2.2　方法学验证 292

23.2.3　母乳中含量 294

23.3　结论 294

参考文献 295

第24章　母乳中多溴二苯醚含量测定 297

24.1　多溴二苯醚测定的仪器与试剂 298

24.1.1　仪器 298

24.1.2　试剂 298

24.1.3　净化材料 300

24.2　母乳样品采集 300

24.3　多溴二苯醚测定的实验方法 300

24.3.1　样品前处理 300

24.3.2　仪器分析条件 302

24.3.3　结果计算 304

24.4　多溴二苯醚测定的结果与讨论 305

24.4.1　方法验证 305

24.4.2　定量内标回收率 305

24.4.3　母乳中含量 305

24.5　结论 307

参考文献 307

第25章　母乳中双酚A及其类似物含量测定 309

25.1　双酚A及其类似物测定的材料与方法 310

25.1.1　仪器 310

25.1.2　试剂 310

25.1.3　实验方法 311

25.2　双酚A及其类似物测定的结果与讨论 313

25.2.1　前处理方法 313

25.2.2　方法学验证 320

25.2.3　母乳中含量 322

25.3　结论 323

参考文献 323

第26章　母乳中邻苯二甲酸酯及其代谢产物含量测定 325

26.1　邻苯二甲酸酯及其代谢产物测定的材料与方法 326

26.1.1　仪器 326

26.1.2　试剂 326

26.1.3　实验方法 328

26.2　邻苯二甲酸酯及其代谢产物测定的结果与讨论 329

26.2.1　固相萃取-液相色谱质谱法的建立 329

26.2.2　方法学验证 333

26.3　结论 335

参考文献 336

第27章　母乳中氯酸盐和高氯酸盐含量测定 337

27.1　氯酸盐和高氯酸盐测定的材料与方法 338

27.1.1　仪器 338

27.1.2　试剂 338

27.1.3　实验方法 339

27.2　氯酸盐和高氯酸盐测定的结果与讨论 340

27.2.1　前处理方法 340

27.2.2　方法学验证 341

27.2.3　加标回收率 343

27.2.4　母乳中含量 343

27.3　结论 345

参考文献 345

第28章　母乳中真菌毒素含量测定 347

28.1　真菌毒素测定的材料与方法 348

28.1.1　仪器 348

28.1.2　试剂 348

28.1.3　实验方法 349

28.2　真菌毒素测定的结果与讨论 350

28.2.1　色谱条件的优化 350

28.2.2　方法学验证 351

28.2.3　母乳中含量 354

28.2.4　与国内外文献的比较 356

28.3　结论 357

参考文献 357

第29章　母乳中液晶化合物含量测定 359

29.1　液晶化合物测定的材料与方法 360

29.1.1　仪器 360

29.1.2　试剂 360

29.1.3　实验方法 360

29.2　液晶化合物测定的结果与讨论 361

29.2.1　APGC-MS/MS方法开发 361

29.2.2　前处理方法开发 362

29.2.3　方法学验证 365

29.2.4　加标回收率 367

29.2.5　母乳中含量 367

29.3　结论 368

参考文献 368

第30章　母乳中重金属含量及形态测定 371

30.1　母乳中重金属含量测定 372

30.1.1　仪器与试剂 373

30.1.2　实验方法 373

30.1.3　结果与讨论 374

30.1.4　结论 379

30.2　母乳中元素形态分析 380

30.2.1　元素形态分析及技术 380

30.2.2　样品前处理 381

30.2.3　形态分析的方法 382

30.2.4　元素形态分析在母乳中的应用 382

参考文献 385

第31章　母乳中指示性多氯联苯含量测定 387

31.1　指示性多氯联苯测定的仪器与试剂 388

31.1.1　仪器 388

31.1.2　试剂 388

31.2　指示性多氯联苯测定的实验方法 390

31.2.1　样品前处理 390

31.2.2　仪器分析条件 392

31.2.3　结果计算 394

31.3　指示性多氯联苯测定的结果与讨论 395

31.3.1　方法验证 395

31.3.2　母乳中含量 395

31.3.3　结论 397

参考文献 397

第32章　母乳中微塑料含量测定 399

32.1　微塑料测定的仪器与试剂 400

32.1.1　仪器 400

32.1.2　试剂 400

32.2　微塑料测定的实验方法 400

32.2.1　样品前处理 400

32.2.2　拉曼光谱测试 401

32.2.3　材质确定 401

32.2.4　质量控制 401

32.3　微塑料测定的结果与讨论 402

32.3.1　前处理方法 402

32.3.2　方法学验证 402

32.3.3　加标回收率 405

32.4　结论 405

参考文献 405